PRÁCTICA 15
TINCIÓN DE GRAM
Material:
- Mechero de alcohol
- Asa de siembra
- Pinza de madera
- Paralelas
- Portaobjetos
- Microscopio electrónico
- Aceite de inmersión.
- Agua destilada
- Frasco lavador
- Vaso de precipitados
- Pipeta Pasteur
- Enterobacteria (contenida en una placa Petri)
- Reactivos: Cristal violeta; Safranina; Solución de Lugol; Alcohol-Acetona
Procedimiento:
1) Verter un poco de agua destilada sobre un vaso de
precipitados.
2) Con ayuda de una pipeta Pasteur verter 1-2 gotas de agua
sobre el portaobjetos.
3) Esterilizar el asa de siembra con ayuda de un mechero de
alcohol.
4) Coger una muestra de la Enterobacteria con el asa de
siembra.
5) Realizar un frotis sobre el portaobjetos.
6) Fijar el frotis por calor.
7) Cubrir la preparación con Cristal Violeta y dejar actuar
durante 1 minuto.
8) Lavar el exceso de colorante, suavemente, con agua
destilada.
9) Cubrir la preparación con líquido de Lugol y escurrir.
10) Volver a cubrirla con líquido de Lugol y dejar actuar durante
1 minuto.
11) Lavar con agua.
12) Decolorar dejando caer Alcohol-Acetona gota a gota sobre
el portaobjetos inclinado. No superar un minuto con la decoloración.
13) Lavar con agua (opcional).
14) Cubrir la preparación con safranina dejando actuar 1
minuto.
15) Lavar suavemente para eliminar el exceso de colorante.
16) Secar y observar al microscopio con objetivo de
inmersión.
Resultado: Bacterias Gram positiva, ya que se observa de color
rojo-rosado.
Comentarios
Publicar un comentario