PRÁCTICA 19

INOCULACIÓN Y AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS: TÉCNICA DE BARRY

Material:

• Papel de aluminio
• Agar estándar
• Agua de peptona
• Espátula de metal
• Vaso de precipitados
• Probeta
• Placa calefactora con agitador
• Matraz Erlenmeyer
• Imán
• Agitador de tubos
• Tubos de ensayo
• Asa de siembra de plástico
• Pipeta graduada de 10 ml
• Pera de seguridad
• Placa Petri
• Mechero de alcohol
• Micropipeta de 100 µl
• Estufa de cultivo

Procedimiento:

1)Pesar 9,4 g de Agar estándar sobre papel de aluminio en la balanza electrónica.

2)Introducir 400 ml de agua destilada en una probeta.

3)Introducir los 9,4 g del Agar estándar en un matraz Erlenmeyer.

4)Introducir los 400 ml de agua en el matraz.

5)Introducir un imán en el matraz y llevarlo a la placa calefactora con agitador.

6)Cuando la mezcla tenga un color homogéneo trasvasar la mezcla a una cazuela colocada sobre una placa calefactora y llevarla a ebullición.

7)Volver a introducir la mezcla en el matraz y esperar a que baje de temperatura (a 45⁰C).

8)Verter un poco de agua de peptona en un vaso de precipitados y desde ahí trasvasar 5 ml a un tubo de ensayo. Coger dicha cantidad con una pipeta graduada y una pera de seguridad.

9)Coger una muestra del tubo de ensayo (de la práctica anterior) con un asa de siembra y llevarlo al tubo de ensayo que contiene los 5 ml de agua de peptona.

10)Llevar el tubo de ensayo al agitador de tubos.

11)Con ayuda de una micropipeta coger 0,1 ml de la mezcla contendida en el tubo de ensayo.

12)Verter esos 0,1 ml en una placa Petri.

13)Llenar hasta la mitad la placa Petri con la mezcla contenida en el matraz Erlenmeyer y esperar a que gelifique.

14)Una vez que haya gelificado, tapar la placa Petri, colocarla bocabajo y llevarla a la estufa de cultivos.